Рәхмәт һеҙгә nature.com сайтына ингәнегеҙ өсөн. Һеҙ ҡулланған браузер версияһында CSS ярҙамы сикләнгән. Иң яҡшы тәжрибә өсөн, беҙ кәңәш итәбеҙ, һуңғы версияһын ҡулланырға браузер (йәки һүндерергә совместимость режимы Internet Explorer). Өҫтәүенә, даими ярҙам тәьмин итеү өсөн, был сайтта стилдәр йәки JavaScript булмаясаҡ.
Көкөртлө водород (H2S) кеше организмына күп тапҡыр физиологик һәм патологик йоғонто яһай. Натрий гидросульфиды (NaHS) биологик тәжрибәләрҙә H2S эффектын баһалау өсөн фармакологик ҡорал булараҡ киң ҡулланыла. NaHS иретмәләренән H2S юғалтыу бер нисә минут ҡына ваҡыт алһа ла, NaHS иретмәләре ҡайһы бер хайуандарҙы өйрәнеүҙә эсәр һыуҙа H2S өсөн донор берләшмәләре булараҡ ҡулланыла. Был тикшеренеүҙең ҡайһы бер авторҙар тәҡдим иткәнсә, сысҡан/сысҡан шешәләрендә әҙерләнгән NaHS концентрацияһы 30 мкМ булған эсәр һыу кәмендә 12–24 сәғәт тотороҡло ҡала алыуын тикшергән. Эсәр һыуҙа NaHS (30 мкМ) иретмәһен әҙерләп, шунда уҡ сысҡан/сысҡан һыу шешәләренә ҡойорға. Һыу шешәһенең осонан һәм эсенән 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 һәм 24 сәғәттә өлгөләр йыйылған, метилен күк ысулы менән сульфидтар миҡдарын үлсәү өсөн. Бынан тыш, ата һәм инә сысҡандарға ике аҙна дауамында NaHS (30 мкМ) инъекцияһы яһала һәм беренсе аҙнала һәм икенсе аҙна аҙағында ҡан һыуытҡысында сульфид концентрацияһы ике көн һайын үлсәнә. Һыу шешәһенең осонан алынған өлгөләге NaHS иретмәһе тотороҡһоҙ була; һәм 24 сәғәттән һуң ул ярашлы рәүештә 72 һәм 75 процентҡа кәмегән. Һыу шешәләре эсенән алынған өлгөләрҙә 2 сәғәт эсендә NaHS кәмеүе һиҙелерлек булмаған; әммә 12 һәм 24 сәғәттән һуң ул ярашлы рәүештә 47 һәм 72 процентҡа кәмегән. NaHS инъекцияһы ата һәм инә сысҡандарҙа ҡан һыуытҡысында сульфид кимәленә йоғонто яһамаған. Һүҙҙе йомғаҡлап, эсәр һыуҙан әҙерләнгән NaHS иретмәләрен H2S донорлығы өсөн ҡулланырға ярамай, сөнки иретмә тотороҡһоҙ. Был ысул менән индереү хайуандарҙы тәртипһеҙ һәм көтөлгәндән кәмерәк күләмдә NaHS менән дусар итәсәк.
Көкөртлө водород (H2S) 1700 йылдан токсин булараҡ ҡулланыла; 1996 йылда Абэ һәм Кимура тарафынан эндоген биосигнал биргән молекула булараҡ уның мөмкин булған роле һүрәтләнә. Һуңғы өс тиҫтә йылда кешенең төрлө системаларында H2S-тың күп һанлы функциялары асыҡлана, был H2S донор молекулаларының сирҙәрҙе дауалауҙа клиник ҡулланыуҙары булыуы мөмкинлеген аңлауға килтерә; ҡара: Чирино һ.б. күптән түгел тикшерелгән өсөн.
Натрий гидросульфид (NaHS) фармакологик ҡорал булараҡ киң ҡулланыла, күп күҙәнәк культураһы һәм хайуандарҙы өйрәнеүҙә H2S эффектын баһалау өсөн5,6,7,8. Әммә NaHS идеаль H2S доноры түгел, сөнки ул тиҙ H2S/HS- иретмәлә үҙгәртелә, полисульфидтар менән еңел бысраныла, еңел окислана һәм осоусан4,9. Күп биологик тәжрибәләрҙә NaHS һыуҙа эрей, һөҙөмтәлә H2S10,11,12 пассив осоу һәм юғалыу, H2S11,12,13 үҙ-үҙенән окисланыу һәм фотолиз барлыҡҡа килә14. Тәүге иретмәләге сульфид H2S11 осоу арҡаһында бик тиҙ юғала. Асыҡ һауытта H2S-тың яртылаш тарҡалыу ваҡыты (t1/2) яҡынса 5 минут тәшкил итә, ә уның концентрацияһы минутына яҡынса 13% кәмей10. NaHS иретмәләренән көкөртлө водородты юғалтыу бер нисә минут ҡына ваҡыт алһа ла, ҡайһы бер хайуандарҙы өйрәнеүҙәрҙә NaHS иретмәләре эсәр һыуҙа көкөртлө водород сығанағы булараҡ 1—21 аҙна дауамында ҡулланыла, 12—24 аҙна һайын NaHS составындағы иретмәне алмаштыра. сәғәт.15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 Был практика фәнни тикшеренеүҙең принциптарына тап килмәй, сөнки препарат дозировкалары уларҙы башҡа төрҙәрҙә, бигерәк тә кешеләрҙә ҡулланыуға нигеҙләнергә тейеш.27
Биомедицинала клиникаға тиклемге тикшеренеүҙең маҡсаты пациенттарҙы ҡарау йәки дауалау һөҙөмтәләре сифатын яҡшыртыу. Әммә күпселек хайуандарҙы өйрәнеү һөҙөмтәләре әлегә кешеләргә тәржемә ителмәгән28,29,30. Был тәржемә етешһеҙлегенең бер сәбәбе – хайуандарҙы өйрәнеүҙең методологик сифатына иғтибар булмауы30. Шуға күрә был тикшеренеүҙең маҡсаты булып тикшерергә ине, 30 мкМ NaHS иретмәләре әҙерләнгән сысҡан/сысҡан һыу шешәләрендә эсәр һыуҙа тотороҡло ҡала аламы 12–24 сәғәт, тип дәғүә итә йәки ҡайһы бер тикшеренеүҙәрҙә тәҡдим ителә.
Был тикшеренеүҙең бөтә тәжрибәләре лә Иранда лаборатория хайуандарын ҡарау һәм ҡулланыу буйынса баҫылған күрһәтмәләргә ярашлы үткәрелгән31. Был тикшеренеүҙең бөтә эксперименталь отчеттары ла ARRIVE йүнәлештәрен үтәгән32. Эндокринология фәндәре институтының, Шәһид Бехешти исемендәге медицина фәндәре университетының этика комитеты был тикшеренеүҙең бөтә эксперименталь процедураларын раҫланы.
Цинк ацетаты дигидраты (CAS: 5970-45-6) һәм һыуһыҙ тимер хлориды (CAS: 7705-08-0) «Биохим», «Хемопахрама» (Косн-сюр-Луар, Франция) компанияһынан һатып алынған. Натрий гидросульфид гидраты (CAS: 207683-19-0) һәм N,N-диметил-р-фенилендиамин (DMPD) (CAS: 535-47-0) һатып алынған Сигма-Олдрич (Сент-Луис, MO, АҠШ). Изофлуран Пирамалдан (Вифлеем, Пенсильвания штаты, АҠШ) һатып алынған. Хлорид кислотаһы (HCl) Merck компанияһынан (Дармштадт, Германия) һатып алынған.
Эсәр һыуҙа NaHS (30 мкМ) иретмәһен әҙерләп, шунда уҡ сысҡан/сысҡан һыу шешәләренә ҡойорға. Был концентрация NaHS-ты H2S сығанағы булараҡ ҡулланған күп һанлы баҫмалар нигеҙендә һайланған; «Фекер алышыу» бүлеген ҡарағыҙ. NaHS — гидратацион молекула, унда төрлө күләмдә гидратацион һыу (йәғни NaHS•xH2O) була ала; етештереүсе фекеренсә, беҙҙең тикшеренеүҙең проценты ҡулланылған NaHS 70,7% (йәғни, NaHS•1,3 H2O), һәм беҙ был ҡиммәтте иҫәпләүҙәрҙә иҫәпкә алдыҡ, унда беҙ 56,06 г/моль молекуляр ауырлыҡ ҡулландыҡ, был һыуһыҙ NaHS-тың молекуляр ауырлығы. Һыу гидратацион (шулай уҡ кристалллашыу һыуы тип атала) — кристаллик структураны тәшкил иткән һыу молекулалары33. Гидраттар ангидраттар менән сағыштырғанда төрлө физик һәм термодинамик үҙенсәлектәргә эйә34.
Эсәр һыуға NaHS өҫтәр алдынан иреткестең рН-ын һәм температураһын үлсәгеҙ. Шунда уҡ NaHS иретмәһен хайуандар кәштәһендәге сысҡан/сысҡан һыу шешәһенә ҡойорға. Һыу шешәһенең осонан һәм эсенән 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 һәм 24 сәғәттә өлгөләр йыйылған, сульфидтар миҡдарын үлсәү өсөн. Һәр өлгө алынғандан һуң шунда уҡ сульфид үлсәүҙәре алынған. Ҡайһы бер тикшеренеүҙәр күрһәтеүенсә, һыу ҡоролмаһының бәләкәй поралар күләме H2S парланыуын минималь кимәлгә еткерә ала, сөнки беҙ ҡоролманың осонан өлгөләр алдыҡ15,19. Был мәсьәлә шешәләге иретмәгә лә ҡағыла кеүек. Әммә һыу шешәһенең муйынындағы иретмә өсөн был хәл булмаған, сөнки ул парланыу тиҙлеге юғарыраҡ булған һәм автооксидланған; ысынында малдар тәүҙә ошо һыуҙы эскән.
Тикшеренеүҙең маҡсатында ата һәм инә Wistar сысҡандары ҡулланылған. Сысҡандарҙы полипропилен кәштәләргә (бер кәштәгә 2—3 сысҡан) стандарт шарттарҙа (температура 21—26 °C, дымлылыҡ 32—40%) 12 сәғәт яҡтылыҡ (иртәнге сәғәт 7-нән 19 сәғәткә тиклем) һәм 12 сәғәт ҡараңғылыҡ (иртәнге сәғәт 7-нән 7-гә тиклем) урынлаштырғандар. Сысҡандарға кран һыуы бушлай ҡулланыла һәм уларҙы стандарт чау (Хорак дамбаһы Парс компанияһы, Тегеран, Иран) менән туҡландыралар. Йәшкә тап килгән (6 ай) инә (n=10, тән ауырлығы: 190-230 г) һәм ир-ат (n=10, тән ауырлығы: 320-370 г) Wistar сысҡандары осраҡлы рәүештә контроль һәм NaHS (30 мкМ) менән эшкәртелгән төркөмдәргә бүленгән (бер төркөмгә n=5). Өлгө күләмен билдәләү өсөн, беҙ KISS (Ябай тотоу, ахмаҡ) алым ҡулланды, был элекке тәжрибә һәм ҡөҙрәт анализы35 берләштерә. Беҙ тәүҙә 3 сысҡан өҫтөндә пилот тикшеренеүҙе үткәрҙек һәм уртаса ҡан һыуытҡысында дөйөм сульфид кимәлен һәм стандарт тайпылышты (8,1 ± 0,81 мкМ) билдәләнек. Һуңынан, 80% ҡөҙрәтен иҫәпкә алып һәм ике яҡлы 5% әһәмиәтлелек кимәлен фаразлап, беҙ алдан өлгө күләмен билдәләнек (n = 5 нигеҙендә алдағы әҙәбиәт) стандартлаштырылған эффект күләменә тап килгән 2.02 алдан билдәләнгән ҡиммәте менән тәҡдим ителгән Фестинг өлгө күләмен иҫәпләү өсөн эксперименталь5. Был ҡиммәтте SD-ға ҡабатлағандан һуң (2,02 × 0,81), күҙалланған асыҡлана торған эффект күләме (1,6 мкМ) 20% тәшкил иткән, был ҡабул ителә. Тимәк, n = 5/төркөм етә, төркөмдәр араһында уртаса 20% үҙгәреште асыҡлау өсөн. Сысҡандар осраҡлы рәүештә контроль һәм NaSH-эшкәртелгән төркөмдәргә бүленгән осраҡлы функцияһын ҡулланып Excel программа тәьминәте 36 (өҫтәмә һүрәт. 1). Һуҡыр итеү һөҙөмтә кимәлендә башҡарылған, ә биохимик үлсәүҙәрҙе башҡарыусы тикшерәүселәр төркөмгә бирелгән эштәр тураһында хәбәрҙар булмаған.
Ике енестәге NaHS төркөмдәре 2 аҙна дауамында эсәр һыуҙа әҙерләнгән 30 мкМ NaHS иретмәһе менән эшкәртелгән; сәғәт һайын яңы иретмә бирелгән, был ваҡыт эсендә тән ауырлығы үлсәнә. Изофлуран наркозы аҫтында бөтә сысҡандар ҡойроҡ остарынан беренсе һәм икенсе аҙна аҙағында ике көн һайын ҡан өлгөләре алынған. Ҡан өлгөләре 3000 г 10 минут центрифугаланған, ҡан һыуытҡысы айырылған һәм –80°C температурала һаҡланған, артабан ҡан һыуытҡысында мочевина, креатинин (Cr) һәм дөйөм сульфид үлсәү өсөн. Ҡан һыуытҡысында мочевина ферментлы уреаза ысулы менән, ә ҡан һыуытҡысында креатинин фотометрик Джаффе ысулы менән сауҙала булған комплекттар (Man Company, Тегеран, Иран) һәм автоматик анализатор (Selectra E, серия номеры 0-2124, Нидерландтар) ярҙамында билдәләнгән. Мочевина һәм Cr өсөн анализ эсендәге һәм анализдар араһындағы үҙгәреш коэффициенттары 2,5%-тан кәмерәк булған.
Эсәр һыуҙа һәм составында NaHS булған ҡан һыуытҡысында дөйөм сульфидты үлсәү өсөн метилен күк (МБ) ысулы ҡулланыла; МБ - иң йыш ҡулланылған ысул үлсәү өсөн сульфид күләмле иретмәләр һәм биологик өлгөләр11,37. МБ ысулы дөйөм сульфид бассейнын баһалау өсөн ҡулланыла ала38 һәм һыулы фазала H2S, HS- һәм S2 рәүешендәге органик булмаған сульфидтарҙы үлсәү39. Был ысулда көкөрт цинк ацетаты булғанда цинк сульфиды (ZnS) рәүешендә ҡойола. Цинк ацетаты яуым-төшөмө — сульфидтарҙы башҡа хромофорҙарҙан айырыу өсөн иң киң ҡулланылған ысул11. ZnS көслө кислоталы шарттарҙа HCl11 ҡулланып яңынан иретелгән. Сульфид ДМПД менән 1:2 стехиометрик нисбәттә реакцияға инә, тимер хлориды (Fe3+ окисландырыусы матдә булып эшләй) катализланған реакцияла МБ буяуын барлыҡҡа килтерә, ул 670 нм40,41 спектрофотометрик рәүештә асыҡлана. МБ ысулының асыҡлау сиге яҡынса 1 мкМ11 тәшкил итә.
Был тикшеренеүҙең 100 мкл һәр өлгө (иретмә йәки ҡан һыуытҡысы) өҫтәлгән пробирка; һуңынан 200 мкл цинк ацетаты (1% мас./күләм дистиллированный һыуҙа), 100 мкл ДМПД (20 мМ 7,2 М HCl), 133 мкл FeCl3 (30 мМ 1,2 М HCl) өҫтәлгән. Ҡатнашма 37°С температурала ҡараңғыла 30 минут инкубациялана. минут дауамында 10 000 г температурала иретмә центрифугалана, ә супернатанттың абсорбцияһы 670 нм температурала микропланшет уҡыусыһы (BioTek, MQX2000R2, Winooski, VT, АҠШ) ярҙамында уҡыла. Сульфид концентрацияһы билдәләнгән ҡулланыу калибровка ҡойроғо NaHS (0-100 мкМ) ddH2O (өҫтәмә һүрәт. 2). Үлсәүҙәр өсөн ҡулланылған бөтә иретмәләр ҙә яңы әҙерләнгән. Сульфид үлсәүҙәре өсөн анализ эсендәге һәм анализдар араһындағы үҙгәреш коэффициенттары ярашлы рәүештә 2,8 һәм 3,4 процент тәшкил иткән. Беҙ шулай уҡ дөйөм сульфид тиосульфаты натрий составында эсәр һыу һәм ҡан һыуытҡысы өлгөләренән алынған нығытылған өлгө ысулын ҡулланып билдәләне42. Натрий тиосульфаты булған эсәр һыу һәм ҡан һыуытҡысы өлгөләре өсөн тергеҙеүҙәр ярашлы рәүештә 91 ± 1,1% (n = 6) һәм 93 ± 2,4% (n = 6) тәшкил иткән.
Статистик анализ Windows өсөн GraphPad Prism программа тәьминәте 8.0.2 версияһы ярҙамында башҡарылған (GraphPad программа тәьминәте, Сан-Диего, Калифорния, АҠШ, www.graphpad.com). NaHS өҫтәгәнгә тиклем һәм унан һуң эсәр һыу температураһын һәм рН-ын сағыштырыу өсөн парлы t-тест ҡулланылған. Юғалтыу H2S NaHS-содержащий иретмәһендә процент кәмеүе булараҡ иҫәпләнгән башланғыс ҡабул итеү, һәм баһалау өсөн, юғалтыу статистик әһәмиәтле булды, беҙ бер яҡлы ҡабатланған-саралар ANOVA башҡарҙы, унан һуң Даннеттың күп тапҡыр сағыштырыу тесты. Тән ауырлығы, ҡан һыуытҡысында мочевина, ҡан һыуытҡысында креатинин, һәм дөйөм ҡан һыуытҡысында сульфид ваҡыт үткән һайын контроль һәм NaHS-эшкәртелгән сысҡандар араһында сағыштырылған төрлө енес ҡулланып, ике яҡлы ҡатнаш (ара-эсендә) ANOVA эҙләп Bonferroni post hoc һынау. Ике ҡойроҡло Р ҡиммәттәре < 0,05 статистик әһәмиәтле тип иҫәпләнде.
Эсәр һыу рН-ы NaHS өҫтәгәнгә тиклем 7,60 ± 0,01, NaHS өҫтәгәндән һуң 7,71 ± 0,03 тәшкил иткән (n = 13, p = 0,0029). Эсәр һыу температураһы 26,5 ± 0,2 тәшкил иткән һәм NaHS өҫтәгәндән һуң 26,2 ± 0,2 тиклем кәмегән (n = 13, p = 0,0128). Эсәр һыуҙа 30 мкМ NaHS иретмәһен әҙерләп, һыу шешәһендә һаҡларға. NaHS иретмәһе тотороҡһоҙ, ваҡыт үткән һайын уның концентрацияһы кәмей. Һыу шешәһенең муйынынан өлгө алғанда тәүге сәғәт эсендә һиҙелерлек кәмеү (68,0%) күҙәтелә, ә 12 һәм 24 сәғәттән һуң иретмәләге NaHS миҡдары ярашлы рәүештә 72 һәм 75% кәмей. Һыу шешәләренән алынған өлгөләрҙә NaHS-тың кәмеүе 2 сәғәткә тиклем һиҙелерлек булмаған, әммә 12 һәм 24 сәғәттән һуң ул ярашлы рәүештә 47 һәм 72 процентҡа кәмегән. Был мәғлүмәттәр күрһәтеүенсә, эсәр һыуҙа әҙерләнгән 30 мкМ иретмәлә NaHS проценты 24 сәғәттән һуң, өлгөләр алыу урынына ҡарамаҫтан, башланғыс ҡиммәттең яҡынса дүрттән бер өлөшөнә тиклем кәмегән (1-се һүрәт).
Сысҡан/сысҡан шешәләрендә эсәр һыуҙа NaHS иретмәһенең (30 мкМ) тотороҡлолоғо. Иретмә әҙерләгәндән һуң һыу шешәһенең осонан һәм эсенән өлгөләр алынған. Мәғлүмәттәр уртаса ± SD (n = 6/төркөм) тип бирелә. * һәм #, Р <0,05 ваҡыт менән сағыштырғанда 0. Һыу шешәһенең фотоһүрәтендә шешәнең осо (асылыуы менән) һәм корпусы күренә. Ос күләме яҡынса 740 мкл тәшкил итә.
Яңы әҙерләнгән 30 мкМ иретмәлә NaHS концентрацияһы 30,3 ± 0,4 мкМ тәшкил иткән (диапазон: 28,7–31,9 мкМ, n = 12). Әммә 24 сәғәттән һуң NaHS концентрацияһы түбәнерәк ҡиммәткә тиклем кәмей (уртаса: 3,0 ± 0,6 мкМ). 2-се һүрәттә күрһәтелгәнсә, тикшерелгән осорҙа сысҡандар ҡағылған NaHS концентрациялары даими булмаған.
Инә сысҡандарының тән ауырлығы ваҡыт үткән һайын һиҙелерлек арта (контроль төркөмдә 205,2 ± 5,2 г-нан 213,8 ​​± 7,0 г-ға тиклем һәм NaHS менән эшкәртелгән төркөмдә 204,0 ± 8,6 г-нан 211,8 ± 7,5 г-ға тиклем); әммә NaHS менән дауалау тән ауырлығына бер ниндәй ҙә йоғонто яһамаған (3-сө һүрәт). Ир сысҡандарҙа тән ауырлығы ваҡыт үткән һайын һиҙелерлек арта (контроль төркөмдә 338,6 ± 8,3 г-нан 352,4 ± 6,0 г-ға тиклем һәм NaHS менән эшкәртелгән төркөмдә 352,4 ± 5,9 г-нан 363,2 ± 4,3 г-ға тиклем); әммә NaHS менән дауалау тән ауырлығына бер ниндәй ҙә йоғонто яһамаған (3-сө һүрәт).
NaHS (30 мкМ) индергәндән һуң инә һәм ата сысҡандарҙа тән ауырлығының үҙгәргәне. Мәғлүмәттәр уртаса ± SEM тип бирелә һәм ике яҡлы ҡатнаш (эсендә-ара) дисперсия анализы ҡулланып сағыштырылған Бонферрони post hoc тесты. n = 5 һәр төркөмдә һәр енес.
Ҡан һыуытҡысында мочевина һәм креатин фосфаты концентрацияһы контроль һәм NaSH-эшкәртелгән сысҡандарҙа сағыштырмаса булған бөтә тикшеренеүҙең. Бынан тыш, NaSH менән дауалау ҡан һыуытҡысында мочевина һәм креатинехром концентрацияһына йоғонто яһамай (1-се табл.).
Ҡан һыуытҡысында дөйөм сульфид концентрацияһы контроль һәм NaHS менән эшкәртелгән ир-ат (8,1 ± 0,5 мкМ ҡаршы 9,3 ± 0,2 мкМ) һәм инә (9,1 ± 1,0 мкМ ҡаршы 6,1 ± 1,1 мкМ) сысҡандар араһында сағыштырмаса булды. көн дауамында NaHS идара итеү ир-ат йәки инә сысҡандарҙа ҡан һыуытҡысында дөйөм сульфид кимәленә йоғонто яһаманы (4-се һүрәт).
NaHS (30 мкМ) индергәндән һуң ата һәм инә сысҡандарҙа ҡан һыуытҡысында дөйөм сульфид концентрацияһының үҙгәргәне. Мәғлүмәттәр уртаса ± SEM тип бирелә һәм ике яҡлы ҡатнаш (эске-эске) дисперсия анализы ҡулланып сағыштырылған Бонферрони post hoc тесты. Һәр енес, n = 5/төркөм.
Был тикшеренеүҙең төп һығымтаһы шунда: составында NaHS булған эсәр һыу тотороҡһоҙ: сысҡан/сысҡан һыу шешәләренең осонан һәм эсенән өлгөләр алынғандан һуң 24 сәғәт үткәс кенә башланғыс дөйөм сульфид составының дүрттән бер өлөшөн генә асыҡларға мөмкин. Бынан тыш, сысҡандар NaHS иретмәһендә H2S юғалыу сәбәпле тотороҡһоҙ NaHS концентрацияһына дусар була, эсәр һыуға NaHS өҫтәү тән ауырлығына, ҡан һыуытҡысында мочевина һәм креатин хромына, ҡан һыуытҡысында дөйөм сульфидҡа йоғонто яһамай.
Был тикшеренеүҙең тиҙлеге H2S юғалтыу 30 мкМ NaHS иретмәләре әҙерләнгән эсәр һыуҙа яҡынса 3% сәғәтенә. Буферлы иретмәлә (100 мкМ натрий сульфиды 10 мМ PBS, рН 7,4), сульфид концентрацияһы ваҡыт үткән һайын 7% кәмеүе тураһында хәбәр ителә 8 h11. Беҙ быға тиклем яҡланы ҡорһаҡ эсенә идара итеү NaHS хәбәр итеү, тип тиҙлеге сульфид юғалтыу 54 мкМ NaHS иретмәһе эсәр һыуҙа яҡынса 2.3% сәғәтенә (4%/сәғәт тәүге 12 сәғәт һәм 1.4%/сәғәт һуңғы 12 сәғәт әҙерләгәндән һуң)8. Элекке тикшеренеүҙәр43 NaHS эретмәләренән H2S-тың даими юғалыуын асыҡлаған, был тәү сиратта осоу һәм окисланыу арҡаһында. Хатта күперткеләр өҫтәмәйенсә лә, запас иретмәһендәге сульфид H2S осоу арҡаһында тиҙ юғала11. Тикшеренеүҙәр күрһәтеүенсә, 30–60 секунд самаһы ваҡыт үткән һыуытҡыс процесында парланыу арҡаһында яҡынса 5–10% H2S юғала6. Һ2S иретмәһенән парланыуын булдырмау өсөн тикшеренүселәр бер нисә сара күргән, шул иҫәптән иретмәне йомшаҡ ҡына болғатыу12, запас иретмәне пластик пленка6 менән ҡаплау һәм иретмәнең һауаға эләгеүен минималь кимәлгә еткереүҙе, сөнки Н2С парланыу тиҙлеге һауа-шыйыҡса интерфейсына бәйле. иондар, бигерәк тә тимер тимер, улар һыуҙағы ҡушылмалар булып тора.13 H2S окисланыу һөҙөмтәһендә полисульфидтар барлыҡҡа килә (көкөрт атомдары ковалент бәйләнештәр менән бәйләнгән)11. Уның окисланыуынан ҡотолоу өсөн, составында H2S иретмәләр әҙерләнә дезоксидированный иреткестәр44,45 һәм һуңынан аргон йәки азот менән таҙартыу өсөн 20-30 минут дезоксигенация тәьмин итеү өсөн.11,12,37,44,45,46 Диэтилентриамин хевентал металь кислотаһы (ДТПА-1) аэроб эретмәләрҙә автооксидациялана. ДТПА булмағанда, HS- автоокисланыу тиҙлеге яҡынса 50% яҡынса 3 сәғәт эсендә 25°C37,47. 1е-сульфидтың окисланыуы ультрафиолет яҡтылығы ярҙамында катализланғанлыҡтан, иретмәне боҙҙа һаҡларға һәм яҡтылыҡтан һаҡларға кәрәк11.
5-се һүрәттә күрһәтелгәнсә, NaHS һыуҙа эреткәндә Na+ һәм HS-6 диссоциациялана; был диссоциация реакцияның рК1-ы менән билдәләнә, ул температураға бәйле: рК1 = 3,122 + 1132/Т, унда Т 5-тән 30°С-ҡа тиклем үҙгәрә һәм Кельвин (К) градустары менән үлсәнә, К = °С + 273,1548. HS- рК2 юғары (рК2 = 19), шуға күрә рН < 96,49 булғанда S2- барлыҡҡа килмәй йәки бик аҙ миҡдарҙа барлыҡҡа килә. Ә HS- нигеҙ булып эшләй һәм H2O молекулаһынан H+ ҡабул итә, ә H2O кислота булып эшләй һәм H2S һәм OH- ға әйләнә.
NaHS иретмәһендә (30 мкМ) иретелгән H2S газының барлыҡҡа килгәне. aq, һыулы иретмә; г, газ; л, шыйыҡса. Бөтә иҫәпләүҙәр ҙә һыу рН = 7,0 һәм һыу температураһы = 20 °C тип фаразлай. БиоРендер.ком менән булдырылған.
15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 интервенция оҙайлылығы менән 1-ҙән 21 аҙнаға тиклем (22 Т). Был тикшеренеүҙең барышында NaHS иретмәһе 12 сәғәт, 15, 17, 18, 24, 25 сәғәт йәки 24 сәғәт, 19, 20, 21, 22, 23 сәғәт һайын яңыртыла. Беҙҙең һөҙөмтәләр күрһәтеүенсә, сысҡандар NaHS иретмәһенән H2S юғалтыу арҡаһында тотороҡһоҙ препарат концентрацияһына дусар була, ә сысҡандар эсәр һыуында NaHS составы 12 йәки 24 сәғәт эсендә ныҡ үҙгәрә (2-се һүрәтте ҡарағыҙ). Был тикшеренеүҙең икеһе һыуҙағы H2S кимәленең 24 сәғәт эсендә тотороҡло ҡалыуы йәки 12 сәғәт эсендә ни бары 2–3% H2S юғалтыуҙары күҙәтелеүе тураһында хәбәр итә, әммә улар ярҙамсы мәғлүмәттәр йәки үлсәүҙәр тураһында мәғлүмәт бирмәй. Ике тикшеренеүҙең күрһәтеүенсә, һыу шешәләренең бәләкәй диаметрлы H2S парланыуын минималь кимәлгә еткерә ала15,19. Әммә беҙҙең һөҙөмтәләр күрһәтеүенсә, был һыу шешәһенән H2S юғалтыуҙы 12-24 сәғәткә түгел, ә 2 сәғәткә генә тотҡарларға мөмкин. Ике тикшеренеүҙең дә билдәләүенсә, беҙ эсәр һыуҙа NaHS кимәле үҙгәрмәгән тип фаразлайбыҙ, сөнки беҙ һыуҙа төҫ үҙгәртеүен күҙәтмәнек; тимәк, һауа ярҙамында H2S окисланыуы әһәмиәтле булмаған19,20. Ғәжәп, был субъектив ысул NaHS-тың ваҡыт үткән һайын концентрацияһының үҙгәргәнен үлсәүгә ҡарағанда һыуҙағы тотороҡлолоғон баһалай.
NaHS эретмәһендә H2S юғалыуы рН һәм температура менән бәйле. Беҙҙең тикшеренеүҙең билдәләнгәнсә, һыуҙа NaHS эретеү һөҙөмтәһендә һелтеле иретмә барлыҡҡа килә50. NaHS һыуҙа эретелгән саҡта эретелгән H2S газының барлыҡҡа килгәне рН ҡиммәтенә бәйле6. Һыулы иретмәнең рН-ы ни тиклем түбәнерәк булһа, H2S газ молекулалары булараҡ NaHS өлөшө шул тиклем ҙурыраҡ була һәм һыулы иретмәнән сульфид күберәк юғала11. Был тикшеренеүҙең береһе лә NaHS өсөн иреткес булараҡ ҡулланылған эсәр һыу рН-ы тураһында хәбәр итмәгән. Күпселек илдәр ҡабул иткән БДСС тәҡдимдәре буйынса, эсәр һыу рН-ы 6,5–8,551 диапазонында булырға тейеш. Был рН диапазонында H2S-тың үҙ-үҙенән окисланыу тиҙлеге яҡынса ун тапҡырға арта13. Һыуҙа NaHS-ты был рН диапазонында иретеү һөҙөмтәһендә иретелгән H2S газының концентрацияһы 1-ҙән 22,5 мкМ-ға тиклем буласаҡ, был NaHS-ты иреткәнсе һыу рН-ын күҙәтеү мөһимлеген һыҙыҡ өҫтөнә ала. Бынан тыш, температура диапазоны тураһында хәбәр өҫтәге тикшеренеүҙең (18–26 °C) һөҙөмтәһендә үҙгәрештәр концентрацияһы иретелгән H2S газ яҡынса 10%, сөнки температура үҙгәрештәре үҙгәртә pK1, һәм бәләкәй үҙгәрештәр pK1 һиҙелерлек йоғонто яһай ала концентрацияһы иретелгән H28 газ. Бынан тыш, ҡайһы бер тикшеренеүҙең оҙайлылығы (5 ай)22, улар барышында температураның ҙур үҙгәрештәре көтөлә, был проблеманы ла киҫкенләштерә.
Бөтә тикшеренеүҙән башҡа one21 эсәр һыуҙа 30 мкМ NaHS иретмәһен ҡулланған. Ҡулланылған дозаны аңлатыу өсөн (йәғни 30 мкМ), ҡайһы бер авторҙар һыулы фазала NaHS етештереү теүәл шул уҡ концентрацияла H2S газ һәм физиологик диапазоны H2S 10 100 мкМ, шуға күрә был доза физиологик диапазон сиктәрендә билдәләне15,16. Башҡалар аңлатыуынса, 30 мкМ NaHS плазма H2S кимәлен физиологик диапазонда, йәғни 5–300 мкМ19,20 һаҡлай ала. Беҙ һыуҙа NaHS концентрацияһын ҡарайбыҙ 30 мкМ (рН = 7,0, Т = 20 °C), был ҡайһы бер тикшеренеүҙәрҙә H2S эффектын өйрәнеү өсөн ҡулланылған. Беҙ иҫәпләй алабыҙ, тип концентрацияһы иретелгән H2S газ 14,7 мкМ, был яҡынса 50% башланғыс NaHS концентрацияһы. Был ҡиммәт башҡа авторҙар тарафынан шул уҡ шарттарҙа иҫәпләнгән ҡиммәткә оҡшаш13,48.
Беҙҙең тикшеренеүҙең, NaHS идаралығы тән ауырлығын үҙгәртмәне; был һөҙөмтә ата сысҡандарҙа башҡа тикшеренеүҙең һөҙөмтәләре менән тап килә22,23 һәм ата сысҡандарҙа18; Әммә ике тикшеренеүҙең хәбәр итеүенсә, NaSH нефректомияланған сысҡандарҙа тән ауырлығының кәмеүен тергеҙгән24,26, шул уҡ ваҡытта башҡа тикшеренеүҙәр NaSH идаралығының тән ауырлығына йоғонтоһо тураһында хәбәр итмәгән15,16,17,19,20,21,25. Бынан тыш, беҙҙең тикшеренеүҙең, NaSH идаралығы йоғонто яһаманы ҡан һыуытҡысында мочевина һәм креатин хром кимәле, был һөҙөмтәләре менән тура килә икенсе report25.
Тикшеренеүҙең һөҙөмтәләре буйынса, 2 аҙна дауамында эсәр һыуға NaHS өҫтәү ата һәм инә сысҡандарҙа ҡан һыуытҡысында сульфидтың дөйөм концентрацияһына йоғонто яһамай. Был табыш Сен һ.б. (16): 8 аҙна 30 мкМ NaHS менән эшкәрткән эсәр һыуҙа контроль сысҡандарҙа плазма сульфид кимәленә йоғонто яһамаған; әммә улар был ҡыҫылыштың нефректомияланған сысҡандар плазмаһында H2S кимәленең кәмеүен тергеҙеүе тураһында хәбәр иткән. Ли и др. (22) шулай уҡ хәбәр итеүенсә, 30 мкМ NaHS менән эшкәрткән эсәр һыуҙа 5 ай дауамында оло сысҡандарҙа плазма ирекле сульфид кимәлен яҡынса 26% арттырған. Башҡа тикшеренеүҙәрҙә эсәр һыуға NaHS өҫтәгәндән һуң әйләнештәге сульфидтың үҙгәргәне тураһында хәбәр ителмәгән.
15,16,19,20,21,22,23 һыу тураһында ентекле мәғлүмәт бирмәгән, ә биш тикшеренеүҙең уларҙы әҙерләү ысулдарында ҡулланылған NaHS сығанағы тураһында телгә алынмаған17,18,24,25,26. NaHS — гидратацион молекула һәм уның һыу гидратацион составы төрлөсә булыуы мөмкин, был бирелгән молярлыҡтағы иретмә әҙерләү өсөн кәрәкле NaHS күләменә йоғонто яһай. Мәҫәлән, беҙҙең тикшеренеүҙең NaHS составы NaHS•1,3 H2O булды. Шулай итеп, был тикшеренеүҙәрҙә ысын NaHS концентрацияһы хәбәр ителгәндәрҙән түбәнерәк булыуы мөмкин.
“Бындай ҡыҫҡа ваҡытлы ҡушылма нисек оҙайлы тәьҫир итә ала?” Позгай һәм башҡалар.21 был һорауҙы бирҙе, ҡасан баһалау эффекты NaHS колит сысҡандар. Был һорауға яуап бирә алыр тип өмөтләнә улар һәм NaHS иретмәләрендә NaHS21 эффектын медиациялаусы H2S һәм дисульфидтарҙан тыш тотороҡлораҡ полисульфидтар булыуы мөмкин тип фаразлай. Тағы бер мөмкинлек: эретмәлә ҡалған NaHS-тың бик түбән концентрацияһы ла файҙалы йоғонто яһауы ихтимал. Ысынында иһә Олсон һ.б. Ҡандағы H2S микромоляр кимәленең физиологик булмауын һәм наномоляр диапазонда булырға йәки бөтөнләй булмауын иҫбатлаған. H2S аҡһым сульфацияһы аша эш итә ала, был кире трансляциянан һуңғы модификация, күп аҡһымдар функцияһына, тотороҡлолоғона һәм локализацияһына йоғонто яһай52,53,54. Ысынында, физиологик шарттарҙа күп кенә бауыр аҡһымдарының яҡынса 10-25 проценты сульфиллана53. Ике тикшеренеүҙең дә тиҙ юҡ итеүен таный NaHS19,23 әммә ғәжәпләндерә, тип белдерә “беҙ контролдә тота концентрацияһы NaHS эсәр һыуҙа уны көн һайын алмаштырыу.”23 Бер тикшеренеүҙең осраҡлы рәүештә белдергән “NaHS стандарт H2S донор һәм йыш ҡына клиник практикала ҡулланыла, үҙен алмаштырыу өсөн H2S.”
Үрҙәге фекер алышыу күрһәтеүенсә, NaHS эретмәнән осоу, окисланыу һәм фотолиз аша юғала, шуға күрә эретмәнән H2S юғалыуын кәметергә ҡайһы бер тәҡдимдәр индерелә. Беренсенән, H2S-тың парланыуы газ-шыйыҡса интерфейсына13 һәм иретмәнең рН-ына бәйле11; тимәк, парланыу юғалтыуҙарын минималь кимәлгә еткерер өсөн, һыу шешәһенең муйынын мөмкин тиклем бәләкәй итеп эшләргә мөмкин, сөнки элек һүрәтләнгән15,19, ә һыу рН-ын ҡабул итеүгә яраҡлы өҫкө сиккә көйләргә мөмкин (йәғни, 6,5–8,551) парланыу юғалтыуҙарын минималь кимәлгә еткерер өсөн11. Икенсенән, H2S-тың үҙ-үҙенән окисланыуы кислород тәьҫире һәм эсәр һыуҙа күсеш металл иондары булыуы арҡаһында барлыҡҡа килә13, шуға күрә эсәр һыуҙы аргон йәки азот менән дезоксидлаштырыу44,45 һәм металл хелаторҙары ҡулланыу37,47 сульфидтар окисланыуын кәметергә мөмкин. Өсөнсөнән, H2S-тың фототарҡалыуына юл ҡуймау өсөн һыу шешәләрен алюминий фольга менән урап ҡуйырға мөмкин; Был практика шулай уҡ яҡтылыҡҡа һиҙгер материалдарға ла ҡағыла, мәҫәлән, стрептозотоцин55. Ниһайәт, органик булмаған сульфид тоҙҙары (NaHS, Na2S, һәм CaS) аша индереү мөмкин шланг түгел, ә эсәр һыуҙа иретелгән, тип элек хәбәр ителгән56,57,58; тикшеренеүҙәр күрһәтеүенсә, сысҡандарға шланг аша индерелгән радиоактив натрий сульфиды яҡшы һеңдерелә һәм бөтә туҡымаларға ла тиерлек тарала. Бөгөнгө көнгә тиклем күпселек тикшеренеүҙәрҙә органик булмаған сульфид тоҙҙары ҡорһаҡ эсенә индерелә; әммә был юл клиник шарттарҙа һирәк ҡулланыла60. Икенсе яҡтан, перораль юл кешеләрҙә иң таралған һәм өҫтөнлөк бирелгән ысул булып тора61. Шуға күрә кимерселәрҙә H2S донорҙарының тәьҫирен перораль шланг ярҙамында баһаларға кәңәш итәбеҙ.
Сикләү - беҙ һыулы иретмәлә һәм ҡан һыуытҡысында сульфидты МБ ысулы менән үлсәнек. Сульфидты үлсәү ысулдарына йод титрлауы, спектрофотометрия, электрохимик ысул (потенциометрия, амперометрия, кулометрик ысул һәм амперометрик ысул) һәм хроматография (газ хроматографияһы һәм юғары етештереүсәнле шыйыҡса хроматографияһы) инә, улар араһында иң йыш ҡулланылған спектрофотометрик ысул2. Биологик өлгөләрҙә H2S үлсәү өсөн МБ ысулының сикләүе шунда: ул бөтә көкөртлө берләшмәләрҙе үлсәй, ә ирекле H2S63 түгел, сөнки ул кислоталы шарттарҙа башҡарыла, һөҙөмтәлә биологик сығанаҡтан көкөрт сығарыла64. Әммә, Америка йәмәғәт һаулығы ассоциацияһы мәғлүмәттәре буйынса, МБ һыуҙа сульфидты үлсәү өсөн стандарт ысул булып тора65. Шуға күрә был сикләү NaHS составындағы эретмәләрҙең тотороҡһоҙлоғо буйынса беҙҙең төп һөҙөмтәләргә йоғонто яһамай. Бынан тыш, беҙҙең тикшеренеүҙең, һыу һәм ҡан һыуытҡысы өлгөләрендә сульфид үлсәүҙәрен тергеҙеү NaHS 91% һәм 93% тәшкил итте. Был ҡиммәттәр элек хәбәр ителгән диапазондарға тап килә (77–92)66, ҡабул итеүгә яраҡлы аналитик теүәллекте күрһәтә42. Шуныһы иғтибарға лайыҡ: беҙ ир-ат һәм инә сысҡандарҙы ла Милли һаулыҡ һаҡлау институттары (NIH) ҡағиҙәләренә ярашлы ҡулландыҡ, клиникаға тиклемге тикшеренеүҙәрҙә ир-атты ғына хайуандарҙы өйрәнеүгә артыҡ таяныуҙан ҡотолоу өсөн67 һәм мөмкин булғанда ир-ат һәм инә сысҡандарҙы ла индереү өсөн68. Был фекерҙе башҡалар ҙа һыҙыҡ өҫтөнә алды69,70,71.
Һүҙҙе йомғаҡлап, был тикшеренеүҙең һөҙөмтәләре эсәр һыуҙан әҙерләнгән NaHS иретмәләрен тотороҡһоҙлоҡ арҡаһында H2S генерациялау өсөн ҡулланып булмауын күрһәтә. Был ысул менән идара итеү хайуандарҙы тотороҡһоҙ һәм көтөлгәндән түбәнерәк кимәлдәге NaHS-ҡа дусар итер ине; тимәк, табыштар кешеләргә лә ҡағылмауы ихтимал.
Ҡулланылған һәм/йәки анализланған мәғлүмәттәр йыйылмаһы ағымдағы тикшеренеүҙең тейешле авторҙан нигеҙле үтенес буйынса алырға мөмкин.
Сзабо, К. Көкөрт водородын (H2S) тикшергән ваҡыт һыҙығы: тирә-яҡ мөхит токсинынан биологик медиаторға тиклем. Биохимия һәм фармакология 149, 5–19. 2017.09.010 (2018).
Абэ, К. һәм Кимура, Х. Эндоген нейромодулятор булараҡ көкөрт водородының мөмкин булған роле. 1066-1071. Нейрофән журналы, 16, 1066-1071. 1996 йылда был йүнәлештәге эшмәкәрлекте үҫтерә.
Чирино, Г., Сабо, С. һәм Папапетропулос, А. Һөт имеҙеүселәр күҙәнәктәрендә, туҡымаларында һәм ағзаларында көкөрт водородының физиологик роле. 103, 31–276. Физиология һәм молекуляр биология буйынса тикшерелгән. 10.1152/физрев.00028.2021 (2023).
Диллон, К.М., Карраццоне, Р.Дж., Матсон, Дж.Б., һәм Кашфи, К. Азот оксиды һәм көкөртлө водород өсөн күҙәнәкле тапшырыу системаларының үҫеш вәғәҙәһе: шәхси медицинаның яңы дәүере. Биохимия һәм фармакология 176, 113931.
Сун, Х., и др. Оҙаҡ ваҡыт яй ғына сығарылған көкөртлө водород донорын ҡулланыу миокард ишемияһын/реперфузия йәрәхәтләнеүҙе иҫкәртергә мөмкин. Ғилми отчеттар 7, 3541. (2017).
Ситдикова, Г.Ф., Фукс, Р., Кайнц, В., Вайгер, Т.М. һәм Герман, А. БК каналының фосфорилләшеүе көкөртлө водород (H2S) һиҙгерлеген көйләй. Физиологияла сиктәр 5, 431.
Ситдикова, Г.Ф., Вайгер, Т.М. һәм Герман, А. Көкөрт водород сысҡан гипофиз шеш күҙәнәктәрендә кальций менән әүҙемләштерелгән калий (БК) каналының эшмәкәрлеген көсәйтә. Архит. Пфлюгерс. 459, 389—397. 10.1007/с00424-009-0737-0 (2010).
Джедди, С., и др. Көкөрт водород 2-се типтағы шәкәр диабеты менән ауырыған сысҡандарҙа миокард ишемияһы-реперфузия йәрәхәтенән нитриттың һаҡлау эффектын көсәйтә. Азот оксиды 124, 15–23. 2022.04.004 (2022).
Корвино, А., и др. H2S донор химияһы тенденциялары һәм уның йөрәк-ҡан тамырҙары ауырыуҙарына йоғонтоһо. Антиоксиданттар 10, 429. 10.3390/антио10030429 (2021).
ДеЛеон, Э.Р., Стой, Г.Ф., һәм Олсон, К.Р. (2012). Биологик тәжрибәләрҙә көкөрт водородының пассив юғалтыуҙары. 421, 203-207. Аналитик биохимия. 10.1016/j.ab.2011.10.016 (2012).
Надь, П., и др. Физиологик өлгөләрҙә көкөртлө водород үлсәүҙәренең химик аспекттары. 1840 йылда донъя күргән «Биохимия һәм биофизик акттар», 876—891. 2013.05.037 (2014).
Клайн, л.л.д. Тәбиғи һыуҙарҙа көкөртлө водородты спектрофотометрик билдәләү. Лимнол. Океаногр. 14, 454—458. 1969.14.3.0454 (1969).
Олсон, К.Р. (2012). Көкөртлө водород химияһы һәм биологияһы буйынса практик күнекмәләр үткәреү. “Антиоксиданттар.” Редокс сигнал биреүҙе. 17, 32–44. 10.1089/арс.2011.4401 (2012).